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生物实验报告(篇1)

质粒DNA的提取、纯化及检测

姓名：XXX学号：2011001400XX年级：20XX级生物基地班 实验日期：2013年9月16日—30日组别：6组 同组者：XX

一、【实验目的】

1、掌握碱变性提取法提取大肠杆菌中质粒DNA的原理和方法。

2、学习并掌握凝胶电泳进行DNA的分离纯化的实验原理。

3、学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。

4、学习并掌握凝胶中DNA的分离纯化方法。

二、【实验原理】

1、质粒DNA的制备方法

质粒（Plasmid）是独立存在于染色体外、能自主复制并能稳定遗传的一种环状双链DNA分子，分布于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中，但在细菌细胞中含量最多。细菌质粒大小介于1～200Kb之间，是应用最多的质粒类群，在细菌细胞内它们利用宿主细胞的复制机构合成质粒自身的DNA。

质粒DNA的制备包括质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途进行选择。本实验选择碱裂解法提取质粒DNA。

2、质粒DNA的提取——碱变性提取法

在细菌细胞中，染色体DNA和质粒DNA均被释放出来，但是两者变性与复性所依赖的溶pH值不同。在pH值高达高盐溶液调节碱性溶液至中性时，变性的质粒DNA可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中；但染色体DNA不能复性，而是与不稳定的大分子RNA、蛋白质—SDS复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心，与复性的溶于溶液的质粒DNA分离。溶于上清液的质粒DNA，可用无水乙醇和盐溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性质类似，乙醇沉淀

DNA的同时，也伴随着RNA沉淀，可利用RNaseA将RNA降解。质粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通过酚/氯仿抽提除去，最后获得纯度较高的质粒DNA。

3、凝胶电泳进行DNA分离纯化

电泳（electrophoresis）是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极方向移动的现象。各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质，它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，移动的速度可因电离子的大小形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异，就可以区别各种大小不同的分子。因而，凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化DNA的片段，是分子生物学的核心技术之一。

凝胶电泳技术操作简单而迅速，分辨率高，分辨范围广。此外，凝胶中DNA的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接观察到，甚至含量少至20pg的双链DNA在紫外激发下也能直接检测到。需要的话，这些分离的DNA条带可以从凝胶中回收，用于各种各样目的的实验。

分子生物学中，常用的两种凝胶为琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶。这两种凝胶能灌制成各种形状、大小和孔径，也能以许多不同的构型和方位进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高，使用于较小分子核酸（的分离和蛋白质电泳。它的分辨率非常高，长度上相差，小片段DNA（最适合在恒定轻度和方向的电场中水平方向的琼脂糖凝胶内电泳分离。琼脂糖凝胶电泳易于操作，适用于核酸电泳，测定DNA的相对分子质量，分离经限制酶水解的DNA的片段，进一步纯化DNA等。

琼脂糖凝胶电泳是一种常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而带有负电荷，在电场中向正极移动。DNA在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率主要取决于DNA分子的构象、琼脂糖浓度、电泳所用电场、缓冲液和温度。

三、【实验材料】

1、实验仪器

培养皿、接种环、三角瓶、酒精灯、恒温振荡培养箱、、高速离心机、漩涡振荡器、微量移液器、不同型号枪头、天平、制胶槽、梳子、电泳仪、吸管、量筒、微波炉、灭菌锅、恒温水浴锅、试剂瓶、卫生纸和记号笔、手套等。

2、实验试剂

LB培养基，抗生素Ap（氨苄青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE缓冲液，饱和酚，氯仿/异戊醇混合液，酚/氯仿/异戊醇（PCI）混合液，预冷无水乙醇，TAE电泳缓冲液（，上样缓冲液（，琼脂糖，溴化乙锭（EB），DNA相对分子质量标准物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5。2的醋酸钠。

四、【实验步骤】

1、准备实验

配制LB液体培养基，分装到10ul移液枪尖各一盒，1。5ml离心管若干于500ml三角瓶中，50ml离心管2个 ，将上述物品包好连同配好的培养基一同灭菌。

2、菌体培养

在含有Ap的LB平板上挑取一环携带有质粒pUC19的E。coli DH5单菌落，接种于20mlLB液体培养基中进行37℃振荡过夜培养，培养基中加Ap100ul

（，质粒pUC19具有Ap抗性基因，使得带有pUC19的质粒得以生长。 过夜培养后菌体量大，杂质较多，然后用移液枪吸取过夜培养物2ml转接于50mlLB液体培养基中，培养基中加入Ap250ul，37℃振荡培养4—6h至对数生长期后期，生长速率快，代谢旺盛，酶系活跃，杂质少，适合提取质粒。

3、质粒提取

（1）称量空的50ml离心管的重量为14。331g，然后将三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒满，液面距管口约1cm，7000rpm离心5分钟后弃去上清液，收集菌体细胞。

（离心，弃去上清，将离心管倒置于吸水纸上，使上清液全部流尽干燥，然后称重得14。437g，则菌体质量为106mg。

（吹吸混匀，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使

溶液密度增加，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部；维持渗透压，防止细胞提前破裂，防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生长。Tris—Cl溶液提供适当的pH。

（，轻加轻摇，冰浴结构向micelle（微囊）结构的相变化导致细胞溶解。同时，强碱性使染色体DNA、质粒DNA和蛋白质变性；SDS为下一步沉淀做铺垫。

（，轻加轻摇，冰浴细胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因为长时间的碱性条件会打断基因组DNA，只要是50－100 kb大小的片断，就不能再被PDS共沉淀。同时变性的质粒DNA复性。反应形成的高盐环境进一步加速了沉淀。

（6）12000rpm离心15min，白色沉淀聚集在离心管一侧，用移液枪将上清液转移到另一洁净的离心管中。然后向上清液中加入1/10体积的3MNaAc混匀，加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀。

（7） 以12000rpm离心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，轻轻地覆盖沉淀，不打散沉淀，洗涤一次。

（8）以12000rpm离心5min，离心管底部DNA沉淀所在面应与收集沉淀面一致。去掉上清液，将离心管上沉淀部位做好标记，将离心管倒置于吸水纸上，干燥5min。粗提取的质粒呈浅黄色，随着水分的减少质粒变为无色。所以为了完全溶解质粒，要在离心管上标记质粒所在位置。

（9）将DNA沉淀溶于1mlTE缓冲液中，移液枪吹吸助溶，然后将溶解液转移到一个Eppendorf管中。TE是pH缓冲液，为DNA提供稳定的生理状态，呈弱碱性，有利于保护碱基对。同时含有EDTA是二价阳离子的螯合剂，抑制DNA酶作用。

4、质粒纯化

（，37℃保温0。5—1h

（Tris饱和苯酚溶液，振荡混匀，7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的Eppendorf管中。苯酚是经Tris饱和后的，显黄色。苯

酚加入后，溶液分层，苯酚向下，下层呈浅黄色，上层溶液无色，在中间产生大量白色沉淀，此为变性后的蛋白质。

（苯酚/氯仿溶液（，振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到到另一洁净的Eppendorf管中。苯酚是强的蛋白变性剂，但是苯酚留在质粒溶液中会影响DNA的酶切，它本身易被氧化，会损伤质粒。氯仿也是蛋白变性剂，但是比酚弱，且能溶解质粒中的脂类，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫，有利于分层更明显。此时溶液中已看不到明显的白色沉淀，但仍有蛋白质的存在。

（4）加入等体积的氯仿溶液，振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的Eppendorf管中，得上清液400ul。

（5）向上清液中加入1/10体积的NaAc混匀，再加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。

（6）以12000rpm，离心15min，弃去上清液，得到DNA沉淀，为白色。

（7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗涤。然后以12000rpm离心5min，离心管底部DNA沉淀所在面应与收集沉淀面一致。

（8）去掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，室温干燥。用50ulTE溶解于1管中。

5、质粒检测

（1）称取0。4g的琼脂糖，置于一锥形瓶中，在三角瓶上标好液面位置，加入40ml的1×TAE电泳缓冲液，再加入5—10ml重蒸水，以补充在溶胶过程中损失的水分。然后置微波炉加热至完全溶化，溶液透明。冷却至50℃左右，倒入制板槽制板。

（2）待胶凝固后，小心拔起梳子，使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入1×TAE 电泳缓冲液，至液面覆盖过胶面2—3cm。取1μl加电泳载样液和3μl质粒样品于小纸片上，用移液枪混匀。

（的移动。

（4） 把胶槽取出，小心滑出胶块，放进EB溶液中进行染色，完全浸泡约5min。

（5）凝胶成像仪观察。

五、【注意事项】

（1）滴加溶液II时，要逐滴加入，且要轻加轻摇溶液使之混匀，整体动作要快，因为强碱在溶液中停留时间不能过长，否则会破坏质粒DNA。

（2）加入溶液III后，生成了大量的絮状沉淀，溶液III中和强碱使质粒复性，不可剧烈震荡， 防止染色体DNA断裂，应该上下颠倒离心管，使其混匀。

生物实验报告(篇2)

霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌

实验目的：

（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。

（2）掌握高压灭菌方法及原理

实验原理：

（1）培养基的制备原理：

培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

从营养角度分析：

营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；?适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；?一定的氧化还原电位；?合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。

（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌

在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温

度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

实验材料与方法

配制培养基所需器材

实验设备：高压蒸汽灭菌器。

实验器材：蓝盖瓶、培养基、天平、砝码、

称量纸、药勺、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。

培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项

高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。

倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。

a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

b.瓶口要过火焰。

c.左手掀开平皿小口。

d.倾注满皿底再多一点，约。

e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。

f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。

分析与讨论

（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?

把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

（预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的.。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。

实验二霉菌的接种与培养

实验目的与要求：掌握霉菌与酵母菌的接种与培养方法。

实验原理：

接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，

选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。

无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，

接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为。

实验材料与方法

（1）实验材料：实验设备：温箱。

实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。

（

啤酒酵母→PDA平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→PDA平板（连续划线法）

小室载玻片培养法：

1、取灭菌后小室平皿。

2、取无菌PDA琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.5～1.0cm2的琼脂块，并将其移至培养小室中的载玻片上，制作过程注意无菌。

3、用接种环取少量霉菌的孢子接种于培养基四周，用无菌镊子

将盖玻片覆盖在琼脂块上，并(转载于:l灭菌的，盖上皿盖，标记，置28～30℃培养3～5d

粮食产品的平板接种：

1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，

反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用2.镊子取粮食种入PDA琼脂内，每皿可接种5-10粒。

放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无

菌操作斜插入盖玻片数张。

注意事项：

2.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

3.接种环使用前，直接在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。

4.接种环使用后，先在火焰周围把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰2－3次，杀灭表面微生物

分析与讨论

1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？

青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素

2、常用霉菌培养基有哪些？

马铃薯蔗糖培养基

豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基察氏培养基

3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？

（

青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采用连续划线接种法接种。（

根霉与毛霉生长区域比较大，应采用点植法。（

实验三霉菌的制片与形态观察

实验目的：学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；

了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解放线菌的基本形态特征。

实验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为,常是细

菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。

实验材料：

（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培养、根霉；

（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。

实验方法：

（一）直接制片观察

于洁净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后小心地盖上盖玻

片。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜（二）小室培养观察

将载玻片直接放低倍镜下观察，再换高倍镜观察。

观察原则：

毛霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜观察孢子囊孢子的形

状、大小。

根霉：菌丝、孢子同毛霉，注意观察有无假根。

曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢

子梗、顶囊、小梗和分生孢子。

青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生

孢子的形状等。实验结果：

分析与讨论：

青霉和曲霉的形态有哪些异同？

青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。

曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的表面放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。

从皮肤取材查真菌如何检查？

生物实验报告(篇3)

实验名称：

观察洋葱表皮细胞。

实验目的：

1、学习制作洋葱表皮玻片标本。

2、学会使用显微镜观察洋葱表皮，用图画记录观察到的洋葱表皮细胞。

3、对比用肉眼、放大镜、显微镜看到的洋葱表皮各有什么不同。

实验重点：

用显微镜观察洋葱表皮细胞。

实验难点：

正确使用显微镜。

实验准备：

分组实验器材：显微镜、洋葱、小刀、清水、滴管、吸水纸、载玻片、盖玻片、镊子、放大镜等。 实验过程：

一、导入课题

出示洋葱。问：如果从它的内表皮上揭下一块，用显微镜来观察能看到些什么呢？（板书课题）

二、制作洋葱表皮玻片标本

1、师讲解并演示制作洋葱表皮玻片标本的方法与步骤。

（1）在一个干净的玻璃载片中间滴一滴清水；

（2）用小刀在洋葱鳞叶片内壁划一个“井”字，用镊子取下“井”中洋葱内表皮放到载玻片的水滴中央，注意标本要平展开，不能折叠；

（3）用盖玻片倾斜着盖到标本上面，放盖玻片时，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有气泡。如水不足，可沿盖玻片边缘滴加；若水分过多，可用吸水纸吸掉；

（4）从盖玻片的一边滴一滴稀释的碘酒，并把玻片微微倾斜，再在盖玻片的另一边用吸水纸吸掉多余的水；

（5）洋葱表皮玻片标本做成可进行观察。

2、学生以组为单位自制玻片标本（最好制三份装片，便于下面的对比观察），教师巡视指导（教育学生注意安全）。[申请书范文网 wWW.swy7.com]

三、观察洋葱表皮细胞

1、先用肉眼观察洋葱表皮将看到的内容画在科学记录本上。

2、再用放大镜观察洋葱表皮将看到的内容画到科学记录本上。

3、学生交流用肉眼和放大镜分别观察到什么？它们有何不同？

4、利用显微镜观察洋葱表皮细胞。

（1）、出示显微镜，引导学生认识显微镜，简介各部分的名称、功能及使用方法，学生每5人一组操作熟悉显微镜。

（2）、各组利用显微镜观察洋葱表皮细胞。（师操作演示：安放――对光――上片――调焦――观察。生一步步跟着操作。）

（3）、学生观察、记录、描画洋葱表皮细胞。教师巡视指导，各组的实验组长监督组员操作是否规范，要求每个人都要操作、都要观察，并将观察结果进行交流。组长将大家在显微镜下的发现画到科学记录本上。

5、全班交流在显微镜下的发现。

（1）各组推荐发言代表谈自己的发现。

（2）各组将所画的观察结果向全班展示。

（3）交流讨论评价。

6、师小结：我们发现放大镜比肉眼、显微镜比放大镜看到的细节更多，更清楚。我们发现洋葱表皮是由一个个比较规则的多边形组成的，而且大多呈长方形，外为细胞壁，内为无色细胞质和细胞核。洋葱表皮上的一个个小房间似的结构，就是洋葱的细胞。（师一边描述一边画洋葱细胞简图）

四、实验结束。

回收实验器材，整理实验桌。

生物实验报告(篇4)

实验室环境微生物的检测

班级：生物工程123 姓名：赵家熙 学号：2012013409

摘要：空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。而实验室中的环境是更为重要的，对微生物的要求更加的高，一个好的实验室环境可以让实验结果更加的精确。本实验通过对实验室空气的采集，对微生物的培养及染色观察来证明证明实验室环境存在微生物，也证明无菌操作的重要性。

关键词：实验室环境，空气，微生物检测，革兰氏染色，形态观察

正文：

前言

实验室空气微生物含量多少可以反映该实验室的空气质量，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。实验室的空气中微生物越少，代表在该实验室做微生物实验的时候误差会小，成功率会高。本实验以牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养实验室中的微生物，利用革兰氏染色法及显微镜观察实验室中空气中的微生物种类及形态。

1. 材料方法

1.1 实验材料

1.1.1样品来源

实验室空气

1.1.2药品

氢氧化钠（固体），牛肉膏，蛋白胨，琼脂粉，Nacl。

1.1.3耗材

培养基（牛肉膏蛋白胨琼脂培养基）无菌水，石棉网，电炉，酒精灯，培养皿，三角瓶，500ml烧杯，玻璃棒，超净工作台，Ph试纸。

1.2方法

1.2.1取样

采集实验室空气样本

1.2.2制作培养基

在蛋白胨2.0g和氯化钠1.0g，做记号，放在火上加热，待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂4.0g，不断搅拌以免粘底。停止加热后冷却，加入配置的NaOH溶液调节PH值至7.2-7.5后倒入三角瓶。

1.2.3高压灭菌

将培养皿和三角瓶用报纸及绳包装后，利用高压灭菌锅将培养皿和装有培养液的三角瓶高压灭菌，121度维持20分钟.

1.2.4分装培养液及加入样本

在超净工作台上将三角瓶中的培养液分装到6个培养皿当中，等培养皿中培养液冷却凝固，将其中三个加入实验室中的空气样本，二个加入超净工作台空气，一个作为对照组。对照组A，实验组B贴标签做记号，倒置放入培养箱中培养。

1.2.5革兰氏染色，观察其种类，形态

将培养好的带有微生物菌落的培养基拿出，取干净的载玻片于实验台上，在载玻片中央滴一滴无菌蒸馏水，将接种环在火焰上烧红，待冷却后从斜面挑取少量菌种与玻片上的水滴混匀后，在载玻片上涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外层尽快的来回通过脱色30s，水洗，吸干。复染：用番红

复染3min，水洗，吸干。待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目标物后用油镜观察，注意细菌细胞的颜色。

2. 结果与分析

2.1 实验结果

图1 图2

图3 图4

图

5

图6

2.2 分析

此次实验实验目的基本完成，但仍存在一些误差。本实验采取如图四，是培养皿中长出的细菌，经查询，此细菌为呼吸道内的杂菌，由于操作时操作者不慎咳嗽将菌注入培养皿中。（3）如图6 使用革兰氏染色法，但镜下观察有重叠现象，制片时为彻底打散细菌。

3. 讨论

本实验除了略微操作失误以外，其他良好，经讨论，我们认为无菌操作时十分重要的，本实验操作简单，步骤清晰，答题没有改动的地方，但在其中一个操作过程中，把培养皿直接放在教室中和超净工作台上是不可取的，导致上述分析中的

（2）失误。我们应该更加注重无菌操作。

3. 参考文献

[1]．《公共场所空气的微生物检测报告》 孙艳萍

[2].《图书馆内外空气微生物检测及资源保护》 王伯秋

[3]. 《基础生物学实验技术》 主编：陈永富 哈尔滨工程大学出版社 2009

生物实验报告(篇5)

微生物实验报告模板

学院：生命科学学院

专业：生物科学类

年级：20xx级

姓名：

学号：1007040085

20xx年XX月XX日

实验十分离产淀粉酶的微生物

一、实验目的

的配制方法。

划线分离接种。

3、用平板划线法和稀释涂布平板发分离微生物。

4、认识为微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。

5、掌握分离产淀粉酶微生物的试验方法和步骤，了解产淀粉酶的微生物种类及形态。

二、实验原理

土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不同土样中各类微生物数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次为放线菌和霉菌。一般在较干燥，偏碱性、有机质丰富的`土壤中放线苗数量较多；酵母菌在一般土壤中的数量较少，而在水果表皮、葡萄园、果园土中数量多些。本次实验从土壤中分离产淀粉酶的微生物，应该取那些富含产淀粉酶的微生物的土样。从复杂的微生物群体中获得只含有一种或某一类型微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的方法有

1、简单单细胞挑取法

2、平板分离法和稀释涂布平板法

此次实验采取的是平板分离法和稀释涂布平板法结合，该方法操作简单，普遍用于微生物的分离与纯化。其原理包括：

1)稀释后的细胞悬液图不在平板上可以分离得单个菌株

下培养微生物，或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物的生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。

3)微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得纯培养。获得单菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等方法完成。

以淀粉作为惟一碳源的培养基培养未分离细菌，能产淀粉酶的细菌能生长，且菌落周围出现透明圈（淀粉不透明，被消化后变透明），则产淀粉酶微生物被分离出来。本实验采用透明圈检验法检测培养物中是否有产淀粉酶微生物的生长。

三、实验仪器及试剂

1、器材：

培养皿、载玻片、盖玻片、普通光学显微镜、量筒、滴管、吸水纸、烧杯、三角瓶、酒精灯、玻璃棒、接种环、镊子、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、、天平、滤纸、pH试纸等。

2、试剂：

配制牛肉膏蛋白胨培养基的原料（牛肉膏、NaCl、琼脂、蛋白胨）、淀粉、卢戈氏碘液、蒸馏水、250ml三角瓶中装90ml无菌水加20粒玻璃珠，作稀释用等。

3、土样：

取自贵州大学农生楼后土壤10g，地下10cm左右。

四、实验步骤：

1、配制牛肉膏蛋白胨培养基：

牛肉膏0.5%…………………………………2g

蛋白胨1%……………………………………4g

NaCl0.5%…………………………………..2g

琼脂2%……………………………………..8g

淀粉0.5%........................................2g

pH……………………………………7.0~7.2

（2）无菌水的制备

分别取9ml蒸馏水加入5支试管中，加塞后用报纸包扎捆绑，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌备用。取90ml蒸馏水加入250ml三角瓶中，同样的操作，灭菌备用。

（3）器皿的准备

将刻度吸管用报纸包扎，培养皿装入专用灭菌杯分别放入高温灭菌箱灭菌备用。

灭菌30min.

2、制备土壤稀释液：

称取土样，加入另一盛有0.000001不同稀释度的土壤溶液。

3、涂布培养：

0.000001浓度的土壤稀释液作为涂布平板培养的对象，将其分别涂布在3个牛肉膏蛋白胨培养基中，共6个培养基，标号，37°C温箱培养48h。

4、选取目的菌株：

两天后对土壤溶液的微生物培养基进行观察，并取两个菌落形态完全一致的分散的单个菌落，对其中一个喷洒卢戈氏碘液，观察其菌落周围是否出现透明圈，如果出现透明圈说明此菌株产淀粉酶，是目的菌株，记录细菌明显的性状。

生物实验报告(篇6)

实 验 报 告

生物传感器 与测试技术

课程名称 生物传感器与测试技术 姓 名 徐梦浙学 号 专 业 生物系统工程指导老师 王建平/叶尊忠

一 热电偶传感器实验

一、 实验目的：

了解热电偶测量温度的原理和调理电路，熟悉调理电路工作方式。

二、 实验内容：

本实验主要学习以下几方面的内容 1. 了解热电偶特性曲线；

2.观察采集到的热信号的实时变化情况。 3. 熟悉热电偶类传感器调理电路。

三、 实验仪器、设备和材料：

所需仪器

四、

myDAQ、myboard、nextsense01热电偶实验模块、万用表

注意事项

五、 在插拔实验模块时，尽量做到垂直插拔，避免因为插拔不当而引起的接插件插针弯

曲，影响模块使用。 六、 禁止弯折实验模块表面插针，防止焊锡脱落而影响使用。 七、 更换模块或插槽前应关闭平台电源。 八、 开始实验前，认真检查热电偶的连接，避免连接错误而导致的输出电压超量程，否

则会损坏数据采集卡。 九、 本实验仪采用的电偶为K型热电偶和J型热电偶。

十、 实验原理：

热电偶是一种半导体感温元件，它是利用半导体的电阻值随温度变化而显著变化的特性实现测温。

热电偶传感器的工作原理

热电偶是一种使用最多的温度传感器，它的原理是基于1821年发现的塞贝克效应，即两种不同的导体或半导体A或B组成一个回路，其两端相互连接，只要两节点处的温度不同，一端温度为T，另一端温度为T0，则回路中就有电流产生，见图50-1（a），即回路中存在电动势，该电动势被称为热电势。

图50-1（a） 图50-1（b）两种不同导体或半导体的组合被称为热电偶。

当回路断开时，在断开处a，b之间便有一电动势ET，其极性和量值与回路中的热电势一致，见图50-1（b），并规定在冷端，当电流由A流向B时，称A为正极，B为负极。实验表明，当ET较小时，热电势ET与温度差（T-T0）成正比

十一、 实验步骤：

十二、 关闭平台电源（myboard），插上热电偶实验模块。开启平台电源，此时可以看到

模块左上角电源指示灯亮。

十三、 打开nextpad,运行热电偶实验应用程序

十四、 查看传感器介绍，了解热电偶的原理及温差与热电势之间的关系。

十五、 在特性曲线页面。选择不同型号的热电偶观察各型号热电偶的V-T，在测温曲线的

下方，手动模拟产生热电势的值，观察测温曲线。

十六、 在实验内容页面中了解实验的内容、操作方式和过程

十七、 在仿真页面任意改变运算放大器的输出电压值和运算放大倍数，记录E（T,T0）和

冷端温度仿真的输出值E（T0），将数据填写到热电偶温度手动测量表中，查表计算热电偶的电势所对应的温度值。 十八、 在测量页面

十九、 选择实际接入的电阻

二十、 在nextsense01中，用杜邦线将R2 R4链接到运算放大器上。

二十一、 调零。将A、B端用杜邦线短接，调节模块右侧下方的电位器，对放大器的输

出Vout进行调零。 二十二、 测量。选择K型或者J型热电偶其中一个，连接到A、B两端，在自动测量页

面，点击页面上的开始按钮进行数据的采集和记录，将热电偶放置到热水中记录温度的变化（温度变化范围至少30度）。 二十三、 在nextpad页面中，点击页面右上的数据保存按钮，选择保存的表格，进行数

据的保存。

二十四、 数据及结论（绘制数据点散图，建立回归方程，分析灵敏度和线性误差）

冷场温度 热电偶输出电势（uV） 20.64 3543.21 20.65 3500.6 20.65 3731.66 20.65 3730.34 20.64 3797.56

测量点温度

87.59 86.81 91.08 91.06 92.3

温度差 66.95 66.16 70.43 70.41 71.66

20.64 20.65 20.65 20.65 20.64 20.65 20.65 20.66 20.66 20.65 20.66 20.65 20.66 20.64 20.66 3815.1 3561.15 3491.3 3509.37 3463.48 3472.74 3514.91 3535.65 3585.15 3601.62 3544.6 3443.76 3421.89 3410.39 3461.66 92.62 87.93 86.63 86.97 86.11 86.29 87.07 87.46 88.38 88.68 87.63 85.76 85.36 85.13 86.1

71.98 67.28 65.98 66.32 65.47 65.64 66.42 66.8 67.72 68.03 66.97 65.11 64.7 64.49 65.44

结论：

实验表明，当ET较小时，热电势ET与温度差（T-T0）成正比，被测传感器的比例系数为54.020。根据半导体的电阻值随温度变化而显著且有规律变化的这一特性，可以实现测温功能。

生物实验报告(篇7)

练习使用显微镜第组

实验日期姓名

正确规范使用放大镜1.练习使用显微镜，学会规范的操作方法。2.能够独立操作显微镜。3.能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图象。显微镜，写有上字的玻片，动、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。1.右手握住镜臂，左手托住镜座。2.把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。安装好目镜和物镜。3.动转换器，使低倍物镜对准通光孔。4.把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目镜内，另一只眼睁开。

步骤与方法

转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。5.把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。6.转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止此时眼睛一定要看着物镜。7.一只眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物象更加清晰。8.练习将所观察的标本移到视野中央，先移动一下标本，物象朝相反的方向移动。

我的发现实验结论备注(缺席学生)